酵母单杂交实验

背景介绍

酵母单杂交实验（Yeast One-Hybrid）是一种体外分析DNA与细胞内蛋白质相互作用的技术方法。首先将感兴趣的DNA序列（通常是某种特定顺式元件）克隆到含有报告基因的酵母表达载体中。将编码候选转录因子的cDNA序列克隆到另一个表达载体中，候选转录因子通常与一种激活域融合，以增强其在酵母中的转录激活能力。将报告载体和表达载体共同转化到酵母细胞中，筛选出与目标DNA序列结合的蛋白质。通过选择性培养基和报告基因表达检测，判断是否存在蛋白质与目标DNA序列的结合。如果候选转录因子与目标DNA序列结合，它会激活报告基因的表达，导致可检测的信号。

应用场景

研究DNA与蛋白之间的相互作用、DNA的结合位点的确定

案例展示

题目：TaPHT1;9-4B and its transcriptional regulator TaMYB4-7Dcontribute to phosphate uptake and plant growth in breadwheat

期刊：New Phytologist   发表时间：2021    影响因子：10.3