凝胶迁移实验(EMSA)

背景介绍

凝胶迁移实验，又称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验，是一种基于蛋白-核酸复合物在凝胶电泳中迁移速度较未结合核酸的探针慢的原理，用于检测蛋白与核酸（DNA或RNA）相互作用的技术。首先，将待研究的DNA或RNA探针进行标记，然后，将标记好的探针与蛋白质样本混合孵育。如果蛋白质能够与探针结合，则会形成蛋白-核酸复合物。再将孵育后的样本进行非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳。由于蛋白-核酸复合物的分子量较大，其在电场中的迁移速度会慢于未结合的探针。电泳结束后，将凝胶上的物质转移到膜上（如尼龙膜），并使用放射性自显影或化学发光等方法进行检测。在膜上，蛋白-核酸复合物会形成一条明显的滞后带（shift band），表明有蛋白与探针发生了相互作用。

应用场景

研究DNA结合蛋白与DNA序列的相互作用、RNA结合蛋白研究

案例展示

题目：GLUTAMATE RECEPTOR-like gene OsGLR3.4 is required forplant growth and systemic wound signaling in rice (Oryza sativa)

期刊：New Phytologist   发表时间：2022    影响因子：10.3