背景介绍
细胞增殖是细胞生长和分裂的过程,是生命体正常生长、发育和修复的重要环节。通过监测细胞增殖,可以了解细胞健康状况、研究癌细胞的生长规律、评估药物对细胞的影响等。
主要检测方法及其适用场景
MTT测定:MTT(噻唑蓝)是常用的比色法试剂,通过细胞线粒体中的脱氢酶将这些试剂还原,形成颜色产物,进而通过分光光度计测定颜色变化来反映细胞的存活和增殖情况。该方法广泛应用于药物筛选、毒性测试和细胞增殖研究。具有操作简单,成本低廉的特点,适用于大规模筛选。
CCK-8测定:CCK-8(细胞计数试剂盒-8)利用水溶性四唑盐WST-8,通过活细胞脱氢酶还原产生黄色的甲臢类化合物,测定其吸光度来反映细胞存活和增殖。该方法适用于细胞毒性测试、药物筛选、细胞增殖检测等。其优点在于无毒性,可以实时监测,灵敏度高。
BrdU标记:BrdU(5-溴-2'-脱氧尿苷)是一种胸苷类似物,在细胞DNA复制过程中掺入新合成的DNA链中,通过抗BrdU抗体标记并检测其含量来评估细胞增殖。该方法适用于需要精确测量DNA合成的实验,如细胞周期研究、细胞分裂评估等。其优点在于特异性高,能够准确反映DNA合成。
Ki-67免疫荧光法:Ki-67是一种在细胞增殖期间表达的核蛋白,通过免疫荧光染色可以检测其在细胞中的表达,反映细胞的增殖状态。该方法广泛应用于组织切片、细胞培养物的增殖检测,尤其是在病理学研究中用于癌症诊断和预后评估。优点在于特异性强,可用于组织切片分析。
案例展示
题目:Network Pharmacology and In Vitro Experimental Verification Reveal the Mechanism of the Hirudin in Suppressing Myocardial Hypertrophy
期刊:Frontiers in Pharmacology 发表时间:2022 影响因子:5.9