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真核转录组测序

真核转录组测序

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背景介绍

真核转录组测序是指利用二代高通量测序平台,对真核生物特定组织或细胞在某个特定状态下转录的所有mRNA进行测序从而获得基因的定量信息根据是否有参考基因组,真核转录组测序可分为有参转录组测序和无参转录组测序。

有参转录组测序利用Illumina平台对样本的mRNA进行测序,将获得的reads与参考基因组进行比对能够全面快速地分析mRNA序列和丰度信息,进行基因结构和新转录本的识别。

无参转录组测序:利用Illumina平台对样本的mRNA进行测序,不依赖参考基因组,将reads进行拼接,组装出最长的转录本作为unigene,以unigene为参考进行后续分析。适用于无参考基因组的物种,或基因组未被完全测序和注释的物种。

应用方向

医学:发育生物学研究、进化生物学研究、疾病机制研究、药物反应研究、癌症机理研究

植物:生长发育研究、抗逆性研究、代谢通路研究、群体遗传学研究

取样要求

样本类型

样本

建议送样量

最低送样量

生物学重复

固体

植物组织

0.5g

100mg

3

动物/人组织

0.3g

100mg

3

液体

半固体真菌

0.5ml

/

3

全血

3ml

2ml

3

血清或血浆

3ml

2ml

3

脑脊液

5ml

2ml

3

外泌体

20-30ug

20-30ug

3

细胞

新鲜培养细胞

5×106

/

3

真菌

5×106个或0.3g

/

3

其它

RNA样本(RIN>7

2μg

1μg

3

研究思路

题目:Single cell transcriptomic analysis of human pluripotent stem cell chondrogenesis

期刊:Nature communication   发表时间:2021    影响因子:17.6

结论:结合单细胞RNA测序和生物信息学分析研究在软骨生成条件下调控hiPSC分化的基因调控网络。鉴定出hiPSC软骨形成过程中神经细胞和黑素细胞脱靶分化的调控的关键基因WNTsMITF

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